转染试剂盒如何使用才能发挥Z大作用
更新时间：2017-01-06 点击次数：1561次
可生物降解的聚合物技术，是一项技术。在此技术的基础之上，合成了新一代的可生物降解多价阳离子聚合物，以此聚合物作为载体，并成功研发了转染试剂盒。转染试剂盒较市场上的其他试剂，具有更高的转染效率及更低的毒性。转染试剂盒不但适用于HEK293, COS-7, NIH-3T3, HeLa, CHO等常用细胞系，同样适用于众多难转染的细胞。
转染试剂盒特点：
、低毒、广谱；
操作简便；
化学性质稳定。
转染试剂盒使用方法
1、细胞铺板：
转染前18-24小时进行细胞的铺板，以便在转染时，贴壁细胞的密度大约在80%左右。
注：培养液中的血清和抗生素不影响转染效率。
2 、转染试剂盒复合物的制备和转染的具体方法：
转染前将所有试剂置于室温10分钟。下面，以转染35 mm培养皿为例，说明转染的具体方法（如果在别的培养器皿中进行转染，各试剂的使用量见表1）：
（1）在转染前30-60分钟，将培养液更换成含血清和抗生素的新鲜培养液。
（2）将1 μg 质粒DNA稀释到50 μL无血清的高糖DMEM，用移液枪吹吸3-4次。
（3）将3 μL HighMax转染试剂稀释到50 μL无血清的高糖DMEM，用移液枪吹吸3-4次。
注：不能使用含血清的培养基进行DNA和转染试剂盒的稀释！因为转染试剂盒转染复合物的形成过程不能含有血清。
（4）将稀释好的转染试剂盒一次性全部加入到已稀释好的质粒DNA中，立即用移液枪吹吸3-4次。
注：此混合的顺序不能反向进行！
（5）室温放置10-15分钟，以形成转染试剂盒复合物。
（6）将上述100 μL 转染试剂盒转染复合物均匀滴入到含细胞的培养皿中。轻轻晃动培养皿，让转染试剂盒复合物分散均匀。
（7）转染后12-18小时，去除含转染试剂盒复合物的培养液，加入含血清和抗生素的新鲜培养液。
（8）24-48小时后检测转染的效率。
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