MiSeq簇生成失败？检查模板管路清洗——MS-102-9999参数与安装要点

产品技术参数

产品名称    MiSeq® Disposable Wash Tubes    

货号    MS-102-9999    

品牌    Illumina    

生产企业    Illumina, Inc.（美国）    

规格    20支/包（20 pack）    

材质    一次性塑料试管    

用途    MiSeq/MiSeq Dx测序仪运行后模板管路清洗    

配套清洗液    0.01% NaOCl溶液（管内配制）    

NaOCl配制方法    50μL 1:25 NaOCl稀释液 + 950μL实验室级用水    

安装位置    洗涤塔盘位置17（Pos 17）    

安装深度    试管管颈与塔盘齐平    

配合耗材    0.5% Tween 20清洗液、洗涤塔盘、500mL洗瓶    

清洗时长    约30分钟（含模板管路清洗）    

适用机型    MiSeq系统、MiSeq Dx系统    

必需工作流程    VeriSeq PGS、其他需模板清洗的流程    

储存条件    常温干燥，避免污染    

供应商    红荣微再生物

常见问题（FAQ）

Q：MS-102-9999在MiSeq测序仪中的具体用途是什么？

A： MS-102-9999为MiSeq系统专用一次性洗涤管，用于运行后清洗（Post-Run Wash）中的模板管路清洗（Template Line Wash）环节。在标准运行后清洗基础上，该试管装载0.01% NaOCl清洗液，插入洗涤塔盘位置17，通过测序仪液路系统对模板管路进行深度清洁，去除残留试剂、盐分结晶及交叉污染物，确保下一次运行的簇生成效率和测序数据质量。

Q：模板管路清洗与普通运行后清洗有何区别？为何必须使用MS-102-9999？

A： 普通运行后清洗仅使用0.5% Tween 20清洗液冲洗射流管路和吸管，耗时约20分钟，可去除一般残留试剂和盐分。模板管路清洗则额外使用0.01% NaOCl溶液，通过MS-102-9999试管导入液路，对模板管路进行氧化消毒，清除可能累积的有机污染物和生物膜，耗时约30分钟。Illumina明确：使用VeriSeq PGS工作流程时，必须执行包含模板管路清洗的运行后清洗；对于常规研究用途，也建议在MCS v2.5或更新版本中定期执行，以降低簇生成失败率和信号衰减风险。

Q：NaOCl清洗液的配制浓度和步骤是什么？浓度偏差有何后果？

A： 标准配制流程为三步：第一步，将36μL 5% NaOCl注入864μL实验室级用水中，混匀得1:25稀释液；第二步，将50μL该1:25稀释液注入MS-102-9999试管内的950μL实验室级用水中，最终得0.01% NaOCl溶液；第三步，将试管插入洗涤塔盘位置17。浓度控制极为关键：若NaOCl浓度过高，可能导致后续运行中簇生成失败；若使用非指定浓度（如直接使用5%原液），可能腐蚀液路系统。若无5% NaOCl，可用实验室级用水配制1mL 0.01% NaOCl溶液替代，但严禁在维护清洗或备用清洗中使用NaOCl。

Q：MS-102-9999在洗涤塔盘中的安装位置有何要求？装错会怎样？

A： 装有0.01% NaOCl清洗液的MS-102-9999试管必须插入洗涤塔盘的位置17（Pos 17），并确保试管管颈与塔盘齐平。该位置经过液路系统设计校准，可使NaOCl溶液在正确时机导入模板管路。Illumina警告：若将含NaOCl的试管插入其他位置，不仅无法达到清洗效果，还可能导致后续测序运行中簇生成失败，甚至损坏MiSeq液路系统。操作前务必核对塔盘位置编号。

Q：该产品适用于哪些MiSeq工作流程？VeriSeq PGS是否必须使用？

A： MS-102-9999适用于所有需要模板管路清洗的MiSeq及MiSeq Dx工作流程。其中，VeriSeq PGS（胚胎植入前遗传学筛查）工作流程在Illumina系统指南中被明确要求执行包含模板管路清洗的运行后清洗，因此MS-102-9999是该临床级应用的必需耗材。对于常规NGS研究应用（如16S rRNA测序、靶向重测序、小型基因组测序等），虽非每次强制，但建议定期（如每5-10次运行或出现簇生成效率下降时）执行一次模板管路清洗，以维持仪器最佳性能。

Q：20支/包的规格如何计算使用量？储存条件是什么？

A： MS-102-9999为20支/包标准包装。每次模板管路清洗消耗1支试管，因此单包可支持20次模板清洗。若实验室每周执行1次模板清洗，单包可用约5个月；若按VeriSeq PGS高频运行（每次运行后均需清洗），需根据月度运行通量计算采购量。该产品为一次性塑料耗材，无特殊温控要求，常温干燥储存即可，但需避免灰尘污染管口。开封后建议尽快使用，长期暴露可能增加污染风险。

Q：红荣微再生物的Illumina MiSeq耗材产品线还包括哪些？

A： 红荣微再生物作为Illumina代理，提供MiSeq系统全系列配套耗材：测序试剂盒（MS-102-2001/2002/2003 v2系列、MS-102-3001/3003 v3系列）、Nano/Micro试剂盒（MS-103-1001/1002/1003）、PR2缓冲液、HT1缓冲液、PhiX对照品、流动槽（Flow Cell）、洗涤塔盘、清洗瓶，以及文库制备试剂盒（如TruSeq系列）。

Q：使用MS-102-9999进行模板清洗的操作注意事项有哪些？

A： 一是浓度精准，务必使用5% NaOCl原液按1:25稀释后再配制0.01%工作液，禁止直接使用高浓度原液；二是位置准确，仅插入洗涤塔盘位置17，操作前核对编号；三是时机正确，仅在运行后清洗（Post-Run Wash）中使用，维护清洗（Maintenance Wash）和备用清洗（Standby Wash）中禁用NaOCl；四是安全防护，NaOCl为潜在危险化学品，操作时穿戴护目镜、手套和实验服，废液按化学废弃物处理；五是运行后保留，清洗完成后将流动槽、洗涤塔盘和剩余清洗液留在仪器上，防止吸管干燥进气。