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Cellex natural killer cell kit protocol
使用流程：
1， PBMC的分离：
a) 准备一支含20ml Ficoll的离心管，将30ml抗凝血（为肝素抗凝的外周血）直接加入管中，800G，升速1,降速1,离心15min；
b) 离心后，将血浆吸出移入另一个50ml离心管中（约15-20ml），将白膜层吸出移入两个15ml离心管中，补充PBS，离心800G，9min；
血浆56℃灭活25min，然后离心3000rpm，3min，待用；
c) 离心后，弃上清，用 PBS重悬细胞，将细胞吹匀后离心，400G，9min；洗涤2次；
d) 用10ml NKGM（I/Kit）重悬细胞沉淀，计数待用。
注：分离PBMC时应注意观察血小板是否分离干净，如去不净可用培养基（NKGM）多洗一次。
2， 刺激活化PBMC步骤
注：整个培养流程中，细胞应处于较为静止的状态，除加液和转移等必须步骤，应避免剧烈吹打和震荡细胞。
a) day0，用20ml PBS轻柔清洗初始NK细胞培养袋（K/Kit）两次；按照下列表格定容，然后用50ml注射器注入初始培养袋中；使用注射器,将培养袋中空气抽净，防止培养袋中有较大的气泡存留；培养袋做好标记，放入37℃，5%CO2培养箱中培养。
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Serial
产品名称
公司/品牌
货号
描述
规格
1
natural killer cell culture kit
Cellex
17510500
NK细胞初期培养袋 (K/Kit)
10ml
Cellex
16087585
NK细胞培养基 (I/Kit)
1000ml
Cellex
16087583
NK细胞培养基-培养袋 (T/Kit)
2 x 1000ml
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