康为世纪 Bacteria Genomic DNA提取试剂
产品名称:康为世纪 Bacteria Genomic DNA提取试剂产品货号:CW0552S英文名称:Bacteria Genomic DNA Kit产品规格:50 preps
产品介绍:
本试剂盒适用于从革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌中提取高纯度总DNA,每次可处理106-108个细胞,获得多至20 μg的总DNA。纯化过程中不需苯酚或氯仿等有毒溶剂,无需乙醇沉淀,一小时内即可获得高纯度DNA。本试剂盒采用优化的缓冲体系使裂解液中的DNA高效特异的结合到硅基质离心吸附柱上,而其他污染物可流过膜,PCR和其他酶促反应的抑制剂可通过两步洗涤步骤被有效去除,最后使用低盐缓冲液或水洗脱,即可获得高纯度DNA。纯化得到的DNA可以直接用于酶切、PCR、Real-TimePCR、文库构建、Southern Blot、分子标记等下游实验。
产品名称:康为世纪 Bacteria Genomic DNA提取试剂
产品货号:CW0552S
产品组份:
产品使用说明:
实验步骤:
以革兰氏阴性菌基因组DNA的提取为例
1.取细菌培养物1-5 ml(106-108个细胞,最多不超过2×109个细胞)置于离心管(自备)中,12,000 rpm(~13,400×g)离心1分钟,尽量吸净上清。
2.向沉淀中加入180 μl Buffer GTL,振荡使菌体重悬。
3.加入20 μl Proteinase K,涡旋混匀,56℃孵育,直至溶液变清亮,孵育过程中每隔一段时间颠倒或震荡离心管使样本分散。
4.加入200 μl Buffer GL,涡旋震荡充分混匀。加200 μl无水乙醇,涡旋震荡充分混匀。短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。
5.将步骤4所得溶液(包括形成的沉淀)全部加入到已装入收集管的吸附柱(Spin
Columns DM)中,若一次不能加完溶液,可分多次转入。12,000 rpm离心1分钟,弃废液,将吸附柱放回收集管中。
6.向吸附柱中加入500 μl Buffer GW1(使用前检查是否已加入无水乙醇),12,000 rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。
7.向吸附柱中加入500 μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),12,000 rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。
8.12,000 rpm离心2分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟,以*晾干。
9.将吸附柱置于一个新的离心管中,向吸附柱的中间部位悬空加入50-200 μl Buffer
GE,室温放置2-5分钟,12,000 rpm离心1分钟,收集DNA溶液,-20℃保存DNA。
以革兰氏阳性菌基因组DNA的提取为例
1.取细菌培养物1-5 ml(106-108个细胞,最多不超过2×109
个细胞)置于离心管(自备)中,12,000 rpm(~13,400×g)离心1分钟,尽量吸净上清。
2.加入180 μl Enzymatic Lysis Buffer(自备)使菌体重悬。
3.37℃孵育30分钟。
4.加入20 μl Proteinase K涡旋震荡,充分混匀。加入200 μl Buffer GL,涡旋震荡混匀。
5.56℃孵育30分钟。
2)如需去除RNA,可在上述步骤完成后,加入4 μl浓度为100 mg/ml的RNase A溶液(货号:CW0601S),震荡混匀,室温放置5-10分钟。
6.加入200 μl无水乙醇,涡旋震荡充分混匀。
7.将步骤6所得溶液(包括形成的沉淀)全部加入到已装入收集管的吸附柱(Spin
Columns DM),若一次不能加完溶液,可分多次转入。12,000 rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
8.向吸附柱中加入500 μl Buffer GW1(使用前检查是否已加入无水乙醇),12,000 rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
9.向吸附柱中加入500 μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),12,000 rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
10.12,000 rpm离心2分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟*晾干。
11.将吸附柱置于一个新离心管(自备)中,向吸附柱中间部位悬空加入50-200 μl Buffer GE,室温放置2-5分钟,12,000 rpm离心1分钟,收集DNA溶液,-20℃保存DNA。
储存与运输:
室温(15-30℃)
产品订购信息:
品牌 货号 名称 规格
康为世纪 CW0552M Bacteria Genomic DNA Kit 200 preps
产品名称:康为世纪 Bacteria Genomic DNA提取试剂
产品货号:CW0552S
关于公司:
康为世纪生物科技股份有限公司是一家立足于生命科学领域,有自主知识产权的国家优良企业,主要从事高附加值、高技术含量的生物试剂的研发与生产,为生命科学研究、基因检测和体外诊断用户提供创新型生物产品和服务。公司曾先后被评为国家优良企业、江苏省科技型中小企业、江苏省瞪羚企业、江苏省民营科技企业。公司建立了专业化、集约化、能够形成自主知识产权的技术创新体系和开放式的合作创新平台,构建成了公司完整的研发创新体系。
产品线主要包括分子诊断原料酶、核酸采集与保护剂、分子诊断检测试剂等,打破了中国生物研究与产业对进口试剂的依赖。
红荣微再——助力分子诊断新未来
红荣微再作为RNA、NGS、ctDNA、qPCR的分子诊断专业供应商,以“传递科学价值,服务科学研究"为宗旨,努力为客户提供质量可靠、货美价优的分子诊断试剂耗材,与客户携手为中国分子诊断的发展而前行。
更多产品信息,直接联系在线客服