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康为世纪 2×Flash MasterMix含染料PCR预混

  • 型   号:CW3009H
  • 价   格:

产品名称:康为世纪 2×Flash MasterMix含染料PCR预混
产品货号:CW3009H
英文名称:2×Flash PCR MasterMix (Dye)
产品规格:40 ml

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产品介绍:

 本品是由一款新型高效的快速DNA Polymerase、Mg2+、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂组成的预混体系,浓度为2×。本产品为康为世纪新型快速DNA聚合酶,具有*的扩增速度与稳定性,延伸速度可达5 s/kb,最短十五分钟完成PCR,长片段(大于3 kb)或者复杂模板可以采用10-30 s/kb的延伸速度或者较多循环数。MasterMix配方使整个反应体系非常稳定,同时复杂模板也能得到有效扩增,超过98%的PCR扩增能一次成功。使用时只需要加入DNA模板和引物,补足水即可反应,可最大限度地减少人为误差、降低污染和节约时间。

  本产品已加入染料(蓝色),反应结束后可直接进行电泳检测。扩增得到的PCR产物3′端附有一个“A"碱基,因此可直接用于T/A克隆,并适用于康为无缝克隆试剂盒(CW3034)、T4连接试剂盒(CW0805)和感受态产品(CW0812)。

 本产品主要适用于超快PCR、复杂模板、复杂二级结构、对高保真性有要求的基因克隆等实验和大规模基因检测。


产品名称:康为世纪 2×Flash MasterMix含染料PCR预混

产品货号:CW3009H



质量控制:

 经检验无外源核酸酶活性;PCR方法检测无宿主残余DNA;能有效地扩增多种基因组中的单拷贝基因。


使用说明:

 以下举例为以人基因组DNA为模板,扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

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实验设定:

1.模板DNA量设定:

模板过量可能导致非特异性扩增或smear。50 μl PCR反应体系中模板DNA推荐使

用量如下:

-人基因组DNA 5 ng-500 ng

-大肠杆菌基因组DNA 50 pg-100 ng

-质粒DNA 10 pg-1 ng

2.引物浓度设定:

引物浓度可设为0.1 μM-1.0 μM之间。引物浓度过低时可能导致扩增产物少。引物浓度过高会抑制特异性扩增,可能导致非特异性扩增。

3.退火温度设定:

一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率

时可适当降低退火温度;发生非特异性反应时可适当提高退火温度。对于复杂模

板,需要调节退火温度实现高效扩增。

4.延伸时间设定:

延伸时间应根据所扩增片段大小设定。以下为推荐的延伸时间:

质粒等简单模板:5-15 s/kb;

常规基因组、cDNA模板:10-15 s/kb;

复杂模板、粗提模板:20-30 s/kb;

(延伸时间不宜过短应至少在5 s/kb以上,也不宜超过30 s/kb)。

5.循环数设定:

可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果

循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前

提下应尽量减少循环次数。


保存条件:-20℃


产品订购信息:

品牌             货号                   名称                               规格

康为世纪 CW3009H  2×Flash PCR MasterMix(Dye)    40 ml


产品名称:康为世纪 2×Flash MasterMix含染料PCR预混

产品货号:CW3009H



关于公司:

康为世纪是主要从事高附加值、高技术含量的生物试剂的研发与生产,为生命科学研究、基因检测和体外诊断用户提供创新型生物产品和服务。康为世纪建立了专业化、集约化、能够形成自主知识产权的技术创新体系和开放式的合作创新平台,构建成了公司完整的研发创新体系。


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