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红荣微再 RNA提取试剂盒(配套762165) * 货号:RF-E-19008-S
产品规格:96 rxn
产品用途:RNA提取
试剂盒类型:磁珠法
提取RNA类型:总RNA
产品介绍:
红荣微再Inspire Spark©血液RNA提取试剂盒为 PAXgene 管保存的血液样本中 RNA的提取提供了一个简单快速的解决 方案。本试剂盒采用超顺磁性的磁性粒子分离 技术提取 RNA,所需样本量少,RNA得率高, 得到的RNA可直接用于RT-PCR、荧光 定量、二代测序、 病毒 RNA 检测以及高通量测序 等下游实验。该试剂盒也可高效的 与液体工作站和磁棒法磁珠自动提取系统配套使用,以进行快速、大样本量的提取。
储存运输:
运输条件:DNase Ⅰ和 DNase 稀释液用干冰运输,其它组分常温运输不超过 10 天。
储存条件:蛋白酶 K、DNase Ⅰ和 DNase 稀释液保存于-20 ℃;磁珠悬液保存于 2-8℃; 其它组分室温保存
产品优势:
1. 起始样本量少,仅需1.8mL血液即可完成提取过程。
2.RNA得率高,得率超过进口金标准试剂。
3.RNA质量好,提取到的RNA可直接用于 RT-PCR、 荧光定量、二代测序、 病毒 RNA检测以及高通量测序等下游实验。
4.提取通量高,可高效的与液体工作站和磁棒法磁珠自动提取系统配套使用,以进行快速、大样本量的提取。
额外设备试剂需求:
1) 磁力架 2) 无水乙醇 3) 异丙醇 4) 无核酸酶水或 0.1% DEPC水 5) 旋转混匀仪 6) 离心机
产品组分:
红荣微再 RNA提取试剂盒(配套762165) * 货号:RF-E-19008-S
竞品对比:
试剂配制: DNase Ⅰ Mix 配制:将10 μL DNase Ⅰ与15 μL DNase稀释液充分混合,并加入125 μL 无核 酸酶水或 0.1% DEPC水混匀,每个反应管中加入150 μL混合液,该溶液需现配现用。 洗涤液 WB 配制:缓冲液 WB1和缓冲液 WB2中分别按试剂瓶标签加入一定量的无水乙醇 ,并做好标记。
操作步骤 :
1、充分混匀后,取1.8 mL PAXgene血置于离心机中,室温、4500 rpm、10 min,弃掉废 液(将离心管倾斜倒置,使液体沿离心管侧壁流出,用吸水纸吸净管壁内残留液体)。
2、向离心管中加入4 mL无核酸酶水或0.1% DEPC水,充分涡旋,重悬沉淀,置于离心机 中,室温、4500 rpm、10 min。弃掉废液(将离心管倾斜倒置,使得液体沿离心管侧壁 流出,并用吸水纸吸净管壁内残留液体)。
3、向离心管中加入350 μL溶解液PDB,充分涡旋,溶解沉淀,加入40μL蛋白酶K和 400 μL裂解液 PLB,涡旋混匀后,将液体转移至1.5 mL离心管中。
4、将离心管置于恒温震荡混匀仪上,56℃、1500 rpm、10 min 后,冷却至室温。
5、加入400 μL异丙醇,混匀后加入20 μL磁珠,用移液枪吹打混匀磁珠,静置5 min后将离 心管转移至磁力架上静置2 min,颠倒混匀,待磁珠*吸附,小心吸弃上清,避免吸弃 磁珠。
6、向离心管中加入400 μL缓冲液WB1,涡旋20s重悬磁珠,转移至磁力架上静置2 min, 待磁珠*吸附,小心吸弃上清,避免吸弃磁珠,室温晾干磁珠3min。
7、向离心管中加入150 μLDNase Ⅰ Mix,置于恒温震荡混匀仪上,37℃、700 rpm、15 min,消化去除 DNA。
8、向离心管中加入650 μL缓冲液 WB1,涡旋20s重悬磁珠,置于旋转混匀仪上混匀5 min。转移至磁力架上静置 2 min,待磁珠*吸附,小心吸弃上清,避免吸弃磁珠。
9、向离心管中加入500 μL缓冲液 WB2,涡旋20s重悬磁珠,转移至磁力架上静置2 min, 待磁珠*吸附,小心吸弃上清,避免吸弃磁珠。
10、向离心管中加入500 μL无水乙醇,涡旋20s重悬磁珠,转移至磁力架上静置2 min,待 磁珠*吸附,小心吸弃上清,避免吸弃磁珠。
11、短暂离心,收集管壁上的液滴,转移至磁力架上,吸弃管底部的液体,空气中晾干5-10 min至磁珠干燥。
12、加入30~50 μL洗脱液 RFW 至离心管中,充分混匀磁珠,室温静止3 min,转移至磁力架上静置2 min,待磁珠*吸附,转移上清至新的离心管中,保存于-20℃备用。
注意事项:
) 蛋白酶 K 溶液勿长时间室温放置,以免影响其活性。
2) 磁珠悬液使用前需涡旋混匀。
3) 由于冰冻、离心可能会对磁珠的性质、性能造成严重的损害,因此请勿对磁珠悬液进 行冰冻和离心操作。
4) RNA 容易降解,在样品前处理的过程中,尽可能加快样本处理速度。
5) PAXgene 管采集血液后放置于常温(18-25℃)至少 2 小时才能进行 RNA 提取。